Amide色谱柱是一种以羰基或氮原子为活性基团的色谱柱,适用于相对极性较强的化合物分离。其独特的表面化学性质使得在分离有机酸、酮、核苷和药物代谢产物等化合物时十分有效。然而,如何正确地进行Amide色谱柱冲洗方法仍是广大工作者所关注的问题。
在对Amide色谱柱进行冲洗时,一般可以选择纯水、甲醇或醋酸乙腈的混合溶液。冲洗溶液不宜过于浓缩,一般以2-5%左右为宜,过于浓缩会加重色谱柱的堵塞程度,从而对色谱性能造成不利影响。
如果需要对极性较强的样品进行分离,则可以选择pH较高的缓冲液,如pH=9的磷酸盐缓冲液或pH=10的碳酸盐缓冲液,具体选择则要根据待分离样品的性质和pH值的耐受性来进行选择。
在进行Amide色谱柱的冲洗时,需要首先清洗一段时间的纯水或甲醇溶液,目的是将未固定或未结晶的Amide基团冲洗掉,以免对色谱柱的分离性能造成不良影响。一般情况下,冲洗需持续1-2小时左右,至使峰形稳定。
在进行缓冲液冲洗时,需要控制好缓冲液的pH值,并在缓冲液和纯水或甲醇溶液之间进行缓慢的过渡,以避免对色谱柱的冲击,从而保证色谱柱的性能。
Amide色谱柱是一种比较娇贵的色谱柱,其冲洗方法需要特别注意以下几点:
综上所述,正确的Amide色谱柱冲洗方法对于保证色谱柱的性能、提高分析精度和降低实验成本都具有重要的意义。
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