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cck8法检测细胞活力公式(使用CCK8法检测细胞活力)

分类: 生活资讯 编辑 : 〃xnm 发布 : 2025-07-22 07:04:25

使用CCK8法检测细胞活力

在细胞学研究中,常常需要了解细胞的活力水平,而CCK8法是一种常用的细胞活性测定方法。本文将介绍CCK8法检测细胞活力的原理、操作步骤和注意事项。

原理

CCK8法利用细胞呈现代谢活跃状态下的还原性代谢产物还原剂对其生物膜中的内过氧化物酶体丙二醇氧化酶(Cytochrome C)进行氧化,其产生的还原性产物再通过漆黑美黄(WST-8)呈现浅黄色产物,同样可以还原为具有水溶性的漆黑明锰(formazan)。

漆黑美黄(WST-8)是一种清晰且易于溶解的钝化卡宁类化合物,当它被还原时,可以产生浅黄色的WST-8形式,接着黑色络合物强赛汀(dye compound Q)和另一个类似维生素C的还原剂N-乙酰-酚胺类,可转化为水溶性的漆黑明锰(formazan)。这种技术方案比还原甲基蓝法和SRB法更灵敏且轻巧易行。

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操作步骤

1. 用PBS或其他类似缓冲溶液将细胞洗涤一下

2. 按照教材或生产商指示的方法将CCK8药液加入细胞悬液,并在细胞孵育箱中孵育几个小时,颜色会有变化,颜色深度代表着细胞活力的程度;或者,您也可以从细胞悬液中沉淀出细胞,然后用CCK8药液进行染色。

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3. 根据验定知识对CCK8染色液的吸光度变化进行分析。

注意事项

1. CCK8药液的染色液需记得完全遮挡光源,因为阳光、灯光等光源都可能影响其准确度,导致数据不准确。

2. 操作前,有必要做好全面的实验室卫生管理,杜绝灰尘和外部污染物的干扰。

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3. 孵育温度和时间、荧光探针液体量请按照使用说明书操作,避免误差。

CCK8法是一种快捷、实用而简单易行的细胞活性检测技术,可以帮助研究人员更全面地了解细胞的代谢水平。希望本文对您有所帮助。

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